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PROGEN最新推出的試劑盒具有超靈敏、超快速（2小時(shí)內(nèi)出結(jié)果）和高重復(fù)性，可檢測(cè)粘質(zhì)沙雷氏菌（Serratia marcescens）的不同殘留核酸酶（包括DENARASER、高鹽DENARASER和BenzonaseR）。該試劑盒可支持生物制造過(guò)程中關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQA）的純度、安全性保障及合規(guī)性標(biāo)準(zhǔn)符合性，同時(shí)相比其他廠商產(chǎn)品可節(jié)省50%的實(shí)驗(yàn)室時(shí)間。

以下為此試劑盒介紹。

??基礎(chǔ)信息

貨號(hào)：PRNUC

品名：Endonuclease ELISA

品牌：PROGEN

用途：快速簡(jiǎn)便的核酸內(nèi)切酶水平定量檢測(cè)

介紹：PROGEN 核酸內(nèi)切酶 ELISA 試劑盒是一種高靈敏度檢測(cè)試劑盒，專為體外檢測(cè)粘質(zhì)沙雷氏菌（Serratia marcescens）來(lái)源的核酸內(nèi)切酶（包括 DENARASE®）及臨床樣本中的 DENARASE® 而設(shè)計(jì)。

該試劑盒可用于多種工藝來(lái)源樣本的檢測(cè)，包括腺相關(guān)病毒（AAV）基因治療載體生產(chǎn)過(guò)程中的樣本。在 AAV 純化過(guò)程中，會(huì)添加核酸酶以降解多余的 DNA 雜質(zhì)。但核酸酶活性若不受控，可能會(huì)破壞關(guān)鍵成分（如 AAV 載體基因組和質(zhì)粒 DNA），進(jìn)而導(dǎo)致產(chǎn)量降低、純度下降，更重要的是可能影響最終基因治療產(chǎn)品的安全性和治療效果。因此，常規(guī)監(jiān)測(cè)核酸內(nèi)切酶水平對(duì)于保障產(chǎn)品完整性、維持治療效果至關(guān)重要。

??工作原理

本核酸內(nèi)切酶 ELISA 試劑盒采用微孔板形式進(jìn)行夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（sandwich ELISA），具體流程如下：

1.微孔板的每個(gè)孔都包被有特異性單克隆捕獲抗體，該抗體可捕獲樣本（如細(xì)胞裂解液或純化病毒制劑）中粘質(zhì)沙雷氏菌來(lái)源的核酸內(nèi)切酶。

2.捕獲的核酸內(nèi)切酶通過(guò)兩步法進(jìn)行檢測(cè)：

?第一步：生物素偶聯(lián)的單克隆檢測(cè)抗體（抗體偶聯(lián)物）與固定化的核酸內(nèi)切酶結(jié)合。

?第二步：辣根過(guò)氧化物酶（HRP）偶聯(lián)鏈霉親和素（HRP 偶聯(lián)物）與生物素分子結(jié)合。

1.加入底物溶液（TMB，四甲基聯(lián)苯胺）后會(huì)發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色強(qiáng)度與孔內(nèi)分析物（核酸內(nèi)切酶）的濃度成正比。

2.使用光度法在 450 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（參比波長(zhǎng)范圍為 620-690 nm），并根據(jù)對(duì)應(yīng)的 DENARASE® 標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知樣本中核酸內(nèi)切酶的濃度。

?為何選擇核酸內(nèi)切酶 ELISA 試劑盒？

•即開(kāi)即用：提供預(yù)包被微孔板及所有必需試劑，無(wú)需額外準(zhǔn)備基礎(chǔ)耗材。

•超高靈敏度檢測(cè)：采用高特異性單克隆抗體，靈敏度優(yōu)于同類競(jìng)品試劑盒。

•節(jié)省時(shí)間：總孵育時(shí)間約 2 小時(shí)，將檢測(cè)耗時(shí)縮短約一半。

•寬動(dòng)態(tài)范圍：在 450 nm 波長(zhǎng)下，檢測(cè)范圍為 32 pg/ml 至 1000 pg/ml。

•檢測(cè)限（LOD）：4 pg/ml。

•定量限（LOQ）：12 pg/ml。

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