complementtech R137說(shuō)明書
名稱：因子H蛋白（大鼠）
目錄號(hào)：R137
可用規(guī)格：100µg/瓶
濃度：1.0 mg/mL（準(zhǔn)確濃度見(jiàn)檢驗(yàn)報(bào)告）
形態(tài)：液體
純度：> 90%（SDS-PAGE法）
緩沖液：10 mM磷酸鈉，145 mM NaCl，pH 7.3
消光系數(shù)A280 nm = 1.682(1.0 mg/mL)
分子量：155000 Da（單鏈）
豁免前：無(wú)，0.22µm過(guò)濾
儲(chǔ)存：-70 ℃
C或以下。避免凍融。
來(lái)源：來(lái)自健康動(dòng)物的正常大鼠血清
預(yù)防措施：使用常規(guī)預(yù)防措施處理動(dòng)物血液制品。
來(lái)源：美國(guó)生產(chǎn)。
從正常大鼠血清中純化大鼠（Rattus Norvegicus）補(bǔ)體因子H（fH）。H因子是補(bǔ)體替代途徑的重要調(diào)控成分。這對(duì)于防止宿主細(xì)胞和組織（尤其是腎臟）的補(bǔ)體激活至關(guān)重要。它具有兩個(gè)功能活性：1）控制替代途徑C3 / C5轉(zhuǎn)化酶的形成和衰減（衰減加速活性）； 2）作為I因子的輔因子，當(dāng)C3b與H因子結(jié)合時(shí)，它通過(guò)蛋白水解作用使C3b失活（輔助因子活性）。據(jù)報(bào)道，C3b結(jié)合蛋白類似于從大鼠血漿中分離出的H因子，它是由大鼠血小板產(chǎn)生的，并起著免疫粘附受體的作用，可清除嚙齒動(dòng)物中的免疫復(fù)合物（Alexander JJ等人（2001年））。
一般描述
大鼠（褐家鼠）補(bǔ)體因子H(fH)從正常大鼠血清中純化而來(lái)。因子H是補(bǔ)體替代途徑的重要調(diào)節(jié)成分。它對(duì)于預(yù)防宿主細(xì)胞和組織（尤其是腎臟）上的補(bǔ)體激活至關(guān)重要。它具有兩種功能活性：1）控制旁路途徑C3/C5轉(zhuǎn)化酶的形成和衰變（衰變加速活性），和2）作為因子I的輔因子，當(dāng)C3b與因子H結(jié)合時(shí)，其蛋白水解使C3b失活（輔因子活性）。據(jù)報(bào)道，C3b結(jié)合蛋白與從大鼠血漿中分離的因子H相似，由大鼠血小板產(chǎn)生，并作為免疫粘附受體在嚙齒類動(dòng)物中清除免疫復(fù)合物（Alexander J.J. et al.(2001))..(2001)).
因子H是由20個(gè)同源結(jié)構(gòu)域組成的155000 Da蛋白，在半柔性串上像微珠一樣排列。N端5個(gè)結(jié)構(gòu)域與C3b結(jié)合并抑制因子b的結(jié)合，從而減少C3/C5轉(zhuǎn)化酶的形成。因子H還與預(yù)形成的C3/C5轉(zhuǎn)化酶（C3b、Bb和C3b、Bb、C3b）結(jié)合，并引起催化亞基Bb的快速釋放（衰變加速）。這些活性對(duì)于控制血漿中替代途徑擴(kuò)增過(guò)程的自發(fā)激活至關(guān)重要。此外，當(dāng)C3b附著在顆粒表面時(shí)，因子H控制這些酶的形成和衰變。對(duì)宿主細(xì)胞有效，對(duì)外來(lái)顆粒效果較差，原因如下。補(bǔ)體的替代途徑是通過(guò)產(chǎn)生液相C3b樣C3(H2O)和C3b的“蜱”不斷激活。因子H可與這些蛋白結(jié)合并作為輔因子，使因子I（一種以活性形式循環(huán)的絲氨酸蛋白酶）可裂解其產(chǎn)生無(wú)活性蛋白（iC3b或iC3(H2O)）的α鏈。如果C3b不以這種方式失活，它繼續(xù)形成C3轉(zhuǎn)化酶，消耗因子b和C3。如果C3b附著在表面，則通過(guò)因子H和i以相似的方式轉(zhuǎn)化為iC3b。當(dāng)C3b駐留在宿主細(xì)胞上時(shí)，由于因子H識(shí)別的宿主標(biāo)記物的存在，因子H更有效。由于因子H識(shí)別的宿主特異性識(shí)別，補(bǔ)體介導(dǎo)的宿主損傷小化。
因子H似乎通過(guò)識(shí)別宿主標(biāo)志物來(lái)調(diào)節(jié)潛在病原體與宿主細(xì)胞和組織之間的區(qū)分。連接到表面的C3b可以啟動(dòng)替代途徑的擴(kuò)增級(jí)聯(lián)。因子H在宿主細(xì)胞上阻止了這一點(diǎn)，并使其發(fā)生在不帶有宿主樣標(biāo)記的表面。這些宿主特異性結(jié)構(gòu)被認(rèn)為是聚陰離子簇，如唾液酸和硫酸化糖胺聚糖。通過(guò)位于因子H結(jié)構(gòu)域6-20的多個(gè)多陰離子結(jié)合位點(diǎn)識(shí)別宿主標(biāo)志物。一個(gè)位點(diǎn)位于結(jié)構(gòu)域7，該結(jié)構(gòu)域的突變(Y402H)與年齡相關(guān)性黃斑變性中的補(bǔ)體激活和組織破壞密切相關(guān)（Zipfel,P.F. et al.(2006)).一個(gè)暫定位點(diǎn)位于結(jié)構(gòu)域12-14區(qū)域，一個(gè)非常重要的位點(diǎn)位于結(jié)構(gòu)域19-20的C-末端。該C-末端位點(diǎn)似乎是幫助結(jié)合宿主表面的主要位點(diǎn)。在遺傳性溶血性尿毒癥綜合征中，影響或位于這些結(jié)構(gòu)域的突變導(dǎo)致補(bǔ)體替代途徑的激活（Zipfel,P.F. et al.(2006)).該位點(diǎn)似乎是參與聚陰離子依賴性二聚體和因子H四聚體形成的位點(diǎn)（Pangburn,M.K. et al.
(2009)).
物理特性和結(jié)構(gòu)據(jù)報(bào)道，大鼠因子H的分子量約為150,000至155,000道爾頓(Daha MR et al.(1982)；Demberg Tet al.(2002)；Alexander JJ et al.，2001)。大鼠因子H的糖基化水平為9.5%（Demberg Tet al.,(2002)。在非還原和還原條件下通過(guò)SDS/聚丙烯酰胺凝膠電泳(Invitrogen)對(duì)純化的大鼠因子H（目錄號(hào)R137）進(jìn)行分析，結(jié)果顯示有一條條帶略微早于人因子H（155,000道爾頓）遷移。使用ProtParam，根據(jù)其氨基酸序列計(jì)算大鼠因子H的消光系數(shù)(E1%/280 nm = 16.82)，并假設(shè)所有Cys殘基對(duì)均形成胱氨酸（即一對(duì)半胱氨酸分子通過(guò)二硫鍵連接）。根據(jù)其氨基酸序列計(jì)算的pI為6.29。Demberg Tet al.(2002)報(bào)告因子H大鼠血清的正常血漿濃度為238 + 21 μg/mL，而Daha MR et al(1982)報(bào)告為244 + 21 μg/mL。
功能參見(jiàn)上述一般描述。
分析H因子的功能試驗(yàn)測(cè)量其衰變加速活性或I因子輔因子活性(Morgan,B.P.(2000))。已報(bào)告了連續(xù)監(jiān)測(cè)的熒光測(cè)定法(Pangburn,M.K. et al.(1983))，該方法利用存在C3b時(shí)ANS（8-苯胺基-1-萘磺酸）的熒光下降約8倍（當(dāng)C3b轉(zhuǎn)化為iC3b時(shí)）。因子H的其他功能試驗(yàn)見(jiàn)人因子H的含量測(cè)定章節(jié)（目錄號(hào)A137）。
使用方便的輔因子測(cè)定法（通過(guò)SDS凝膠測(cè)定純化C3b的裂解）測(cè)定純化大鼠因子H（目錄號(hào)R137）的輔因子活性。
在存在1µg人因子I（目錄號(hào)A138）的情況下，將4 μg(4 μg)大鼠C3b（目錄號(hào)R114）與不同量的大鼠因子H（目錄號(hào)R137，范圍為0.1至1µg，總體積為12µL）共同孵育。將試驗(yàn)置于濕冰上，然后在37 ℃下孵育15 min，此時(shí)向試管中加入含還原劑的SDS樣品緩沖液，并將樣品加熱5 min。SDS凝膠分析顯示，在 > 0.02 μg大鼠因子H和1 μg人因子I存在的情況下，大鼠C3b的α鏈裂解 > 90%。
功能在上述一般描述章節(jié)中描述了因子H的生物學(xué)功能。
遺傳學(xué)大鼠因子H染色體位置13。大鼠因子H的NCBI基因ID編號(hào)為155012，UniProt登錄號(hào)為Q91YB6。
預(yù)防措施/毒性/危害：該蛋白從動(dòng)物血漿/血清中提純，因此必須采用適用于處理任何動(dòng)物血源性產(chǎn)品的預(yù)防措施。
危害代碼：B WGK Germany 3MSDS可根據(jù)要求提供。
CAS登記號(hào)：80295-65-4
