creativemolecules 002SS說(shuō)明書(shū)
DTSSP-H8/D8
產(chǎn)品信息DTSSP-H8/D8二硫代琥珀酰亞胺丙酸酯12 x 1 mg DTSSP-H8和DTSSP-D8 NO NO OO SO SO xx xx xx xx xNaO SO3Na 3S x = H-DTSSP-H8 x = D-DTSSP-D8目錄號(hào)：編號(hào)：002SS分子式：C14H14N2Na2O14S4/C14D8H6N2Na2O14S4分子量：MW 608/616特征：同位素編碼。
水溶性。
化學(xué)可裂解。
CID可裂解。
DTSSP-H8/D8是一種水溶性、同雙功能、同位素編碼的可裂解交聯(lián)劑二硫代磺基琥珀酰亞胺丙酸酯。
試劑的輕(H8)和重(D8)形式的區(qū)別在于重形式的8個(gè)氘原子，而不是輕形式的8個(gè)氫原子，否則在化學(xué)上是相同的。同位素編碼能夠在質(zhì)譜中明確檢測(cè)交聯(lián)產(chǎn)物。DTSSP-H8/D8的反應(yīng)產(chǎn)物將在質(zhì)譜中表現(xiàn)為強(qiáng)度相等的雙峰，對(duì)應(yīng)于試劑的輕(H8)和重(D8)形式，以8.05016 Da除以電荷狀態(tài)（+ 1為8.05，+ 2為4.03，+ 3為2.68等）。
在pH 7-9緩沖液中，N-羥基磺琥珀酰亞胺(NHS)酯主要與伯氨基(-NH2)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。因此，交聯(lián)反應(yīng)應(yīng)避免使用含胺的緩沖液（Tris、甘氨酸、銨鹽等）。
DTSSP具有水溶性，可在水中制備貯備液。為制備50 mM DTSSP-H8/D8儲(chǔ)備液，向含有1 mg試劑的預(yù)稱(chēng)重管中加入33 μL水。
使用以下公式計(jì)算肽交聯(lián)物的質(zhì)量：
[M12+H]+
= [M1+H]+
+[M2+H]+
+172.97310
[M1OH + H]+
= [M1+H]+
+191.99149
[M1i + H]+ =[M1 + H]+
+173.98093
[M1NH2 + H]+
= [M1+H]+
+191.00747
其中，M1、M2-游離肽的質(zhì)量；M12-肽間交聯(lián)的質(zhì)量；M1OH-死端交聯(lián)的質(zhì)量；M1i-
肽內(nèi)交聯(lián)；M1NH2–死端酰胺的質(zhì)量（如果用銨鹽淬滅反應(yīng)）。
MS-Bridge（http://prospector.ucsf.edu）橋聯(lián)元素組成：C6 H6 O2 S2；–OH的修飾元素組成
末端C6 H8 O3 S2；–NH2末端的修飾元素組成：C6 H9 N1 O2 S2。
FLAG(DYKDDDDK)肽試驗(yàn)反應(yīng)的典型MALDI質(zhì)譜圖見(jiàn)圖1。
試劑的輕(H8)型反應(yīng)產(chǎn)物為：1013–無(wú)FLAG肽；1187–肽內(nèi)交聯(lián)；1205–
死端交聯(lián)；2199-肽間交聯(lián)。
DTSSP-H8/D8交聯(lián)物可被DTT裂解（圖2）（參考文獻(xiàn)1）或CID（圖3）。在這兩種情況下，
仍用H4/D4原子同位素標(biāo)記交聯(lián)，并將在光譜中表現(xiàn)為等強(qiáng)度峰的雙峰分離
除以電荷狀態(tài)4.03 Da。與CID一樣，裂解可以在CID的兩個(gè)C-S鍵中的任何一個(gè)發(fā)生。
交聯(lián)劑，導(dǎo)致構(gòu)成肽間的每個(gè)單獨(dú)肽的兩組H4/D4雙鏈被66 Da分開(kāi)
交聯(lián)（圖3）（參考文獻(xiàn)2、3）。
