E-GL01
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶從復(fù)雜的碳水化合物和糖蛋白上裂解所有非還原性的末端β-連接的N-乙酰氨基葡萄糖殘基。
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶從復(fù)雜的碳水化合物和糖蛋白上裂解所有非還原性的末端β-連接的N-乙酰氨基葡萄糖殘基。
GlcNAc在雙天線(xiàn)，三天線(xiàn)和四天線(xiàn)寡糖上的不同鍵的切割速率很大程度上取決于相鄰殘基的空間位阻。與β（1-3）-連接的甘露糖相連的β（1-2）GlcNAc殘基以高的速率裂解，而與β（1-6）-連接的甘露糖相連的β（1-2）GlcNAc殘基在2000年以高的速率裂解。所有三種低聚糖的比率低。β（1-6）GlcNAc殘基（如果存在）以第二高的速率去除，而β（1-4）GlcNAc則以第三高速率去除。在三天線(xiàn)結(jié)構(gòu)上，該殘留物以第二高速率被去除。與β-連接的甘露糖連接的二等分的β（1-4）GlcNAc嚴(yán)重阻礙了其他GlcNAc殘基的裂解-裂解需要高濃度的酶和延長(zhǎng)的孵育時(shí)間。
來(lái)源：重組從肺炎鏈球菌在大腸桿菌。
EC： 3.2.1.52
替代名稱(chēng)： β-N-乙酰氨基葡糖苷酶，N-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷N-乙酰氨基葡糖水解酶，氨基葡萄糖苷酶，己糖苷酶
內(nèi)容物：-n-acetylglucosaminidase-kit.jpg)
20 mM Tris-HCl，25 mM NaCl，pH 7.5中的N-乙酰氨基葡萄糖苷酶
5x反應(yīng)緩沖液250 mM磷酸鈉，pH 5.0
比活度： > 80 U / mg
活度： > 50 U / mL
分子量：?140,000道爾頓
pH范圍： 5-7，宜5.0
建議用法：
1.在試管中加入多達(dá)100 µg糖蛋白或1 nmole寡糖。
2.用去離子水將終體積調(diào)整為14 µL。
3.加入4 µL 5x反應(yīng)緩沖液（pH 5.0）。
4.加入2 µL N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。
5.在37°C下孵育3小時(shí)。
注意：如果存在平分的GlcNAc或β（1-2）GlcNAc- α（1-6）Man，則將孵育時(shí)間延長(zhǎng)至18小時(shí)。
特異性：切割所有非還原性末端β-連接的N-乙酰氨基葡萄糖。平分GlcNAc會(huì)使反應(yīng)變慢。
比活測(cè)定：定義為在37℃，pH 5.0下從對(duì)硝基苯基-β-DN-乙酰氨基葡萄糖生成1 µmol對(duì)硝基苯酚（p NP）所需的酶量。
儲(chǔ)存：將酶儲(chǔ)存在4℃。
純度：每批N-乙酰氨基葡糖苷酶均按以下方法污染蛋白酶。將10 µg變性的BSA與2 µL酶孵育24小時(shí)。經(jīng)處理的BSA的SDS-PAGE分析未顯示降解跡象。
生產(chǎn)宿主菌株已經(jīng)過(guò)廣泛測(cè)試，不會(huì)產(chǎn)生任何可檢測(cè)的糖苷酶。
穩(wěn)定性：妥善存放至少12個(gè)月即可穩(wěn)定。幾天暴露于環(huán)境溫度不會(huì)降低活性。
配套產(chǎn)品：
過(guò)程控
清洗糖漿-外糖苷酶處理后從糖漿混合物中去除酶
標(biāo)記和釋放聚糖的衍生化
1.弗吉尼亞州克拉克，N。Platt和TD Betters。肺炎鏈球菌β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆和表達(dá)。具有修飾的糖苷配基特異性的截短酶的產(chǎn)生。 生物化學(xué)雜志270：8805-8814（1995）。
2. Dwek，RA，CJ Edge，DJ Harvey，MR Wormald和RB Parekh。糖蛋白相關(guān)寡糖的分析。Ann Rev Biochem 62： 65-100（1993）。
3.格拉斯哥，LR，JC保爾森和RL希爾。從肺炎鏈球菌 的五個(gè)糖苷酶的系統(tǒng)純化J Biol Chem 252： 8615-8623（1977）。
4. Kobata，A 。內(nèi)切和外切糖苷酶在糖綴合物結(jié)構(gòu)研究中的用途。Anal Biochem 100： 1-14（1979）。
5. Prime，S.，J。Dearnley，AM Venton，RB Parekh和CJ Edge?；谕馇刑擒蘸蛢?nèi)切糖苷酶消化的寡糖測(cè)序以及產(chǎn)物的液相色譜分析。 Chromatogr A 720： 263-274（1996）。
試劑盒包括酶加反應(yīng)緩沖液。
足以進(jìn)行多達(dá)60個(gè)反應(yīng)
