PolyPlus-transfection（PT）是一家位于法國的生物技術公司，目前已經(jīng)通過了ISO9001:2000質量體系認證。該公司擁有十幾年的的轉染試劑研發(fā)經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)了一系列的轉染試劑，如：基因的體內和體外轉染試劑、寡核苷酸轉染試劑和siRNA轉染試劑等，可以根據(jù)不同的需要獲得穩(wěn)定或瞬時的轉染效果
| 試劑 | FectoPRO ® |
|---|---|
| 分子交付 | 脫氧核糖核酸 |
| 應用領域 | 生物生產(chǎn) |
| 細胞類型 | 懸浮液CHO，HEK-293及其衍生物 |
| 轉染數(shù) | 1毫升FectoPRO的®足以轉染800毫升到1升以上的細胞培養(yǎng)的 |
| 存儲 | 5°C±3°C，適當存放可穩(wěn)定1-2年 |
| 提供 | FectoPRO ®助推器 |
使用瞬時轉染和基因表達獲得的蛋白質產(chǎn)量。
FectoPRO®轉染試劑盒專門設計用于使用低DNA量（<1 µg / ml細胞培養(yǎng)物）在各種無血清培養(yǎng)基中的CHO和HEK-293懸浮細胞中增強瞬時基因表達（TGE）。
FectoPRO®介導的轉染過程可輕松擴展至幾毫升到幾升的細胞培養(yǎng)，確保強大的可重復生產(chǎn)蛋白質。更高的生產(chǎn)率和對DNA的低要求使FectoPRO®成為生物生產(chǎn)過程中具有成本效益的解決方案。
訂購信息：
| Product | Reference Number | Transfection Reagent | Expression Booster | Expression Medium |
|---|---|---|---|---|
| FectoPRO® Reagent | 116-001 | 1 ml | 1 ml | - |
| FectoPRO® Reagent | 116-010 | 10 ml | 10 ml | - |
| FectoPRO® Reagent | 116-040 | 4 x 10 ml | 4 x 10 ml | - |
| FectoCHO® CD Medium | 716-01L | - | - | 1 L |
| FectoCHO® CD Medium | 716-06L | - | - | 6 x 1 L |
| FectoCHO® Expression System | 716-01LKIT | 1 ml | 1 ml | 1 L |
| FectoCHO® Expression System | 716-06LKIT | 5 x 1 mL | 5 x 1 mL | 6 x 1 L |
FectoPRO ®使驚人的高蛋白質和抗體的產(chǎn)率在兩個CHO和HEK-293細胞在無血清培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)的（圖1）。
圖1 FectoPRO ®給出了在懸浮的CHO細胞驚人抗體生產(chǎn)產(chǎn)量。將細胞以1×106細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表達培養(yǎng)基中接種，并用FectoPRO染®（0.8微克DNA / ml）或的FreeStyle™MAX試劑（1.25微克DNA / ml）的下列推薦的方案針對各個試劑。重組小鼠IgG產(chǎn)率，使用蛋白G的生物傳感器（福特生物轉染后1?6天測定®八位字節(jié)RED96系統(tǒng)）。FreeStyle™是Life Technologies™Corporation的商標。數(shù)據(jù)由ProteoGenix SAS（法國）友善提供。
了解我們的套件致力于CHO細胞：FECTOCHO ®表達系統(tǒng)
FectoPRO ®很大程度上優(yōu)于其它轉染試劑如線性PEI在生物生產(chǎn)過程中常用的轉染效率（圖2）而言，導致優(yōu)異的蛋白質生產(chǎn)產(chǎn)率（圖3）。
圖2 FectoPRO ®給出了在懸浮的CHO細胞轉染效率高。的FreeStyle™CHO-S細胞以1×10接種6個細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表達培養(yǎng)基中，并用FectoPRO轉染® + FectoPRO ®使用0.4微克/毫升和1.25微克/毫升的助推器或的FreeStyle™MAX試劑表達GFP的質粒。轉染24小時后，使用熒光顯微術測定GFP表達。
圖3 FectoPRO ®給出在懸浮液中的CHO和HEK-293細胞優(yōu)于蛋白質生產(chǎn)的產(chǎn)率。的FreeStyle™CHO-S和HEK-293F細胞以1×10接種6個細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO或293表達培養(yǎng)基并用FectoPRO轉染® + FectoPRO ®助推器（0.4微克DNA /毫升），自由式™ MAX試劑（1.25微克DNA / ml）或PEIpro ®（1個微克DNA /毫升）以下推薦的協(xié)議用于相應的試劑。在轉染后72小時（CHO細胞）和120小時（HEK-293細胞），通過蛋白G親和定量（HPLC）和Western Blot測定IgG3-Fc（34kDa）的產(chǎn)生。標準對應于純化的IgG3-Fc（34 kDa）。
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高質量質粒DNA的制備可能非常昂貴，尤其是在大量DNA大量生產(chǎn)大量蛋白質需要大量質粒的情況下。FectoPRO ®節(jié)省40?60％的DNA成本通過使用0.4至0.6微克DNA / 10 6個細胞/ ml的細胞培養(yǎng)物; 因此，使該套件成為生物生產(chǎn)過程中可承受且經(jīng)濟的解決方案。
表1 DNA的量和試劑（FectoPRO的體積®和競爭對手）根據(jù)生產(chǎn)商的建議轉染。
蛋白質生產(chǎn)過程的持續(xù)時間在過去幾年中有所增加，現(xiàn)在大多數(shù)蛋白質生產(chǎn)過程會持續(xù)1-2周，以獲得宜量的蛋白質生產(chǎn)。FectoPRO ®已經(jīng)發(fā)展到保證持續(xù)生產(chǎn)蛋白質在幾天內，同時保持較高的細胞活力，可以長期保存蛋白生產(chǎn)（圖4）。
圖4 FectoPRO ®給出了在懸浮細胞持續(xù)蛋白質生產(chǎn)。的FreeStyle™HEK-293F細胞以1×10 6個細胞/ ml的30毫升的FreeStyle™293表達培養(yǎng)基的接種，并用FectoPRO轉染® + FectoPRO ®按照標準方案助推器（0.5微克DNA /毫升）中。在不同的時間點后，通過蛋白G親和定量（HPLC）測定IgG3-Fc的產(chǎn)生。FreeStyle™CHO-S可獲得類似的結果（數(shù)據(jù)未顯示）。
強大的協(xié)議可輕松適應各種培養(yǎng)皿，從而簡化您的生物生產(chǎn)過程。FectoPRO ®介導的轉染，可以線性地從30毫升放大到升細胞培養(yǎng)物的無協(xié)議適配（圖5）。
圖5 FectoPRO ®是在CHO細胞中易于擴展和重現(xiàn)的。的FreeStyle™CHO-S細胞以1×10接種6個細胞/ ml在30毫升100毫升300毫升或1升的FreeStyle™CHO表達培養(yǎng)基中，并用FectoPRO轉染® + FectoPRO ®助推器（0.5微克DNA / ml）的。在第1至6天，使用臺盼藍排除法（A）測定細胞活力，并通過蛋白G親和定量（HPLC）（B）和Western Blot（C）測定IgG3-Fc的產(chǎn)生。標準品（C）對應于純化的IgG3-Fc（34 kDa）。
FectoPRO ®制造和使用配制高度控制生產(chǎn)過程。這樣可確保實驗之間的結果均具有高度可重復性。此外，為了滿足當前的管理指南，F(xiàn)ectoPRO ®使用釋放先進的質量控制包括用于蛋白質生產(chǎn)率的規(guī)范，保證優(yōu)良批與批之間的一致性（圖6）。
圖6. FectoPRO ®提供優(yōu)異的批與批的重現(xiàn)。懸浮CHO細胞以1×10接種6個細胞/ ml在30ml CHO培養(yǎng)基中，并使用3個不同批次FectoPRO的轉染®（CCIII 078，CCIII 104或CCIII 106）按照標準方案。轉染72小時后，通過蛋白G親和力定量測定IgG3-Fc的產(chǎn)生。在懸浮的HEK-293細胞上獲得了相似的結果（數(shù)據(jù)未顯示）。
不像其它可商購的試劑，F(xiàn)ectoPRO ®轉染試劑盒是適合于CHO和HEK-293細胞（圖2和3）。該試劑與各種培養(yǎng)基配方兼容; 因此，實驗室的實施非常簡單明了（圖7，表2）。
圖7 FectoPRO ®給出了在不同培養(yǎng)基中生長的懸浮的CHO細胞優(yōu)于蛋白質生產(chǎn)的產(chǎn)率。CHO細胞以1×10接種6個細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表達培養(yǎng)基中，CD CHO培養(yǎng)基或Pro-CHO™4培養(yǎng)基并用FectoPRO轉染® + FectoPRO ®助推器或的FreeStyle™MAX試劑以下對推薦的方案各自的試劑。轉染72小時后，通過蛋白G親和定量（HPLC）測定IgG3-Fc的產(chǎn)生。
使用FectoPRO表2蛋白質產(chǎn)量®在不同培養(yǎng)基中的CHO細胞。
使用FectoPRO表3.蛋白質產(chǎn)量®在不同培養(yǎng)基中于HEK-293細胞。
發(fā)現(xiàn)我們的套件致力于CHO細胞：FECTOCHO ®表達系統(tǒng)
自由式TM，CD FortiCHO TM，CD的OptiCHO TM，Expi293 TM，ExpiCHO TM和CD293是Gibco公司的商標®。
Pro-CHO TM，PowerCHO TM和Pro293 TM是Lonza TM Group的商標。
HyClone TM，HyCell TM和TransFx TM是GE Healthcare TM的商標。
BalanCD ®和Transfectory TM是Irvine Scientific公司的商標TM。
FectoPRO ®也非常適合病毒生產(chǎn)。
