yellow网站在线观看_137大胆人体在线观看_亚洲视频一区_成人乱人伦精品视频在线观看_清纯唯美亚洲综合一区_jizz18日本_国产亚洲精品精品国产亚洲综合_一本色道69色精品综合久久_伊人久久大香_午夜爽爽爽男女免费观看

歡迎進(jìn)入上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司!
技術(shù)文章
首頁(yè) > 技術(shù)文章 > InGex TGIRT5x50 說(shuō)明書(shū)

InGex TGIRT5x50 說(shuō)明書(shū)

 更新時(shí)間:2017-08-14 點(diǎn)擊量:1805

世界*實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商 InGex正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國(guó)代理, InGex在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶(hù)提供zui為的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國(guó)科研客戶(hù)帶來(lái)的產(chǎn)品,的服務(wù),簽約 InGex就是為了給廣大科研客戶(hù)帶來(lái)更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿(mǎn)意將是我們zui大的收獲

InGex中國(guó)代理InGex上海代理, InGex北京代理,InGex廣東代理, InGex江蘇代理InGex湖北代理,InGex天津,InGex黑龍江代理,InGex內(nèi)蒙古代理,InGex吉林代理,InGex福建代理, InGex江蘇代理, InGex浙江代理, InGex四川代理,

 

InGex.com是Ingex有限責(zé)任公司的所在地,也是TGIRT™-III獨(dú)立酶和TGIRT™模板切換RNA-seq試劑盒的*授權(quán)銷(xiāo)售商。

  •  

  • TGIRT™-III Enzyme

  •  

*規(guī)格:

  •  10 Reactions (TGIRT10)
  •  50 Reactions (TGIRT50)
  •  5 x 50 µl (TGIRT5x50)
  •  10 x 50 µl (TGIRT10x50)

單位定義:

  • TGIRT的一個(gè)單元® -III逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)活性是酶的使用聚在60℃下聚合1納摩爾的dNTP的在1分鐘(RA)所需要的量/寡(dT)42作為底物。

酶濃度:

  • 200單位/μl

酶儲(chǔ)存緩沖液:

  • 20mM Tris-HCl(pH7.5),500mM KCl,1mM EDTA,1mM DTT,50%甘油

酶性質(zhì)和新型活性:

  • 比逆轉(zhuǎn)錄病毒逆轉(zhuǎn)錄酶更高的熱穩(wěn)定性,持續(xù)性和保真度,允許從高度結(jié)構(gòu)化或嚴(yán)格修飾的RNA進(jìn)行全長(zhǎng)的端到端cDNA合成。1
  • 新的端對(duì)端模板切換活動(dòng),其能夠在逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中連接RNA-seq或PCR適配器,并且不再需要單獨(dú)的RNA 3' - 銜接子連接步驟。1這種模板切換活動(dòng)大大促進(jìn)了鏈特異性RNA-seq文庫(kù)的構(gòu)建,其偏倚偏差小于使用隨機(jī)六聚體引物的方法,或者使用RNA連接酶進(jìn)行銜接連接。1,4,7,8
  • 退火引物有效的cDNA合成 將退火的引物應(yīng)具有推測(cè)的T  > 60 ö下用在反應(yīng)混合物中基板在室溫下,通過(guò)加入dNTP的反應(yīng)開(kāi)始30分鐘酶的建議預(yù)孵育。新應(yīng)用的*條件應(yīng)通過(guò)測(cè)試25至450 mM NaCl的鹽濃度范圍來(lái)確定。

酶的建議用途:

  1. 綜合股特異性轉(zhuǎn)錄組分析。8
  2. 全細(xì)胞,外來(lái)體,血漿和其他無(wú)細(xì)胞RNA的RNA-seq。7,8
  3. miRNA和其他小型非編碼RNA的分析。1,11,14
  4. 通過(guò)高通量測(cè)序鑒定RNA堿基修飾。4,5,12,13
  5. RIP-seq,HITS-CLIP,CRAC,??核糖體分析。1,9
  6. 使用諸如SHAPE和DMS修飾之類(lèi)的方法進(jìn)行RNA結(jié)構(gòu)映射。1,15
  7. 長(zhǎng)cDNA的合成 1
  8. RT-qPCR的。1
  9. 用于表征RNA-蛋白質(zhì)相互作用的irCLIP。9
  10. DMS-MaPseq用于全基因組或靶向RNA結(jié)構(gòu)體內(nèi)探測(cè)。15
  11. FFPE腫瘤樣本分析(咨詢(xún)InGex)
  12. 通過(guò)TGIRT®模板切換的單鏈DNA-seq(參見(jiàn)InGex)

酶的優(yōu)點(diǎn):

  1. 綜合轉(zhuǎn)錄組分析比傳統(tǒng)方法更少的偏差。

    根據(jù)zui近的出版物,核糖核酸裂解的片段化通用人參考RNA樣品的TGIRT-seq 概括了與非鏈特異性TruSeq v2相比較的人轉(zhuǎn)錄本和尖峰的相對(duì)豐度,優(yōu)于鏈特異性Tru-Seq v3。TGIRT®-seq比TruSeq v3顯著更強(qiáng)的鏈特異性,并消除TruSeq固有的隨機(jī)六聚體啟動(dòng)的取樣偏差。TGIRT®-seq顯示更均勻的5'至3'基因覆蓋,并識(shí)別比TruSeq更多的剪接點(diǎn)。TGIRT®-seq可以在與結(jié)構(gòu)化小ncRNA(包括tRNA)相同的RNA序列中同時(shí)進(jìn)行mRNA和mRNA的分析,這些tRNA基本上不存在于TruSeq數(shù)據(jù)集中。8

  2. 全細(xì)胞,外來(lái)體,血漿和其他細(xì)胞外RNA的RNA-seq。

    快速處理時(shí)間(通過(guò)PCR步驟對(duì)RNA-seq文庫(kù)構(gòu)建<5小時(shí)); 需要少量RNA(低ng范圍); 全面的轉(zhuǎn)錄譜,包括mRNA和lncRNA以及小ncRNA,包括tRNAs,pre-miRNAs和其他結(jié)構(gòu)化小ncRNA的全長(zhǎng)讀數(shù); 較常規(guī)方法較少的偏差和較大的鏈特異性。7,8

  3. 比逆轉(zhuǎn)錄病毒RT更高的持續(xù)性和鏈置換活性。

    • 使用錨定寡核苷酸(dT)引物構(gòu)建多聚腺苷酸化RNA的RNA-seq文庫(kù),具有比沒(méi)有核糖核酸步驟的逆轉(zhuǎn)錄病毒RT更均勻的5'至3'覆蓋率。1
    • 通過(guò)基于毛細(xì)管電泳的方法,如SHAPE或DMS結(jié)構(gòu)圖,通過(guò)顯著的長(zhǎng)度讀取長(zhǎng)度和比逆轉(zhuǎn)錄病毒RT更少的過(guò)早停止來(lái)實(shí)現(xiàn)RNA結(jié)構(gòu)測(cè)繪。1
    • 使得可以獲得tRNA和其他小的ncRNA的全長(zhǎng)的端到端cDNA,這些cDNA對(duì)于逆轉(zhuǎn)錄病毒RT是難治的。4-7
  4. 通過(guò)TGIRT®模板切換的RNA-seq文庫(kù)構(gòu)建,如miRNA分析,RIP-seq,HITS-CLIP,CRAC,??核糖體分析等方法。

    快速處理時(shí)間(通過(guò)PCR步驟對(duì)RNA-seq文庫(kù)構(gòu)建<5小時(shí)); 需要少量RNA(低ng范圍); 不需要RNA連接酶,通過(guò)在該過(guò)程中具有較少的步驟,偏倚較小并且更有效。

參考文獻(xiàn):

    1. Mohr,S.,Ghanem,E.,Smith,W.,Sheeter,D.,Qin,Y.,King,O.,Polioudakis,D.,Iyer,VR,Hunicke-Smith,S.Swamy, Kuersten,S.and Lambowitz,AM Thermostable group II intron reverse transcriptase fusion proteins and their use in cDNA synthesis and next generation RNA sequencing。RNA 19,958-970,2013。
    2. Collins,K。和Nilsen,T. Enzyme engineering through evolution:熱穩(wěn)定重組II內(nèi)含子逆轉(zhuǎn)錄酶為RNA研究和生物技術(shù)提供了新的工具。RNA 19,1017-1018,2013。
    3. Enyeart,PJ,Mohr,G.,Ellington,AD和Lambowitz AM移動(dòng)組II內(nèi)含子及其逆轉(zhuǎn)錄酶的生物技術(shù)應(yīng)用:基因靶向,RNA-seq和非編碼RNA分析。 DNA 5:2,2014。
    4. Katibah,GE,Qin,Y.,Sidote,DJ,Yao,J.,Lambowitz,AM和Collins,K.Ban and adaptability RNA structure recognition by the human interferon-induced tetratricopeptide repeat protein IFIT5。PROC。國(guó)家科??茖W(xué)院??茖W(xué)。,USA,  111,12025-12030,2014。  
    5. Shen,PS,Park,J.,Qin,Y.,Li,X.,Parsawar,K.,Larson,MH,Cox,J.,Chen,Y.,Lambowitz,AM,Weissman,JS,Brandman,O. ,和Frost,A.Rqc2p和60S核糖體亞基介導(dǎo)新生鏈的mRNA非依賴(lài)性伸長(zhǎng)??茖W(xué)347,75-78,2015年。
    6. Zheng,G.,Qin,Q.,Clark,WC,Yi,C.,He,C.,and Lambowitz,AMand Pan,T.Efficient and quantitative high-throughput transfer RNA sequencing。Nature Methods,12,835-837,2015。
    7. Qin,Y。,Yao,J。,Wu,D。,Nottingham,R.,Mohr,S,Hunicke-Smith,S.,Lambowitz,AM,High-throughput sequencing of human plasma RNA by using thermostable group II intron reverse酶。RNA 22,111-128,2016。
    8. Nottingham,RM,Wu,DC,Qin,Y.,Yao,J.,Hunicke-Smith,S.,and Lambowitz,AM RNA-seq of human reference RNA samples using a thermostable group II intron reverse transcriptase。RNA,22,597-613,2016。
    9. Zarnegar,BJ,F(xiàn)lynn,RA,Shen,Y.,Do,BT,Chang,HY和Khavari,PA irCLIP platform for characterization of protein-RNA interactions。Nature Methods 13,489-492,2016。
    10. Haque,N.和Hogg,JR更容易,更好,更快,更強(qiáng):改進(jìn)的RNA-蛋白質(zhì)相互作用研究的方法,Mol。Cell,2016 http //dx.doi.org/10.1016/j.molcel.2016.05.019
    11. Bazzini,AA,del Viso,F(xiàn).,Moreno-Mateos,MA,Johnstone,TG,Vejnar,CE,Qin,Y.,Yao,J.,Khokha,MK和Giraldez,AJ Codon identity regulates mRNA stability and translation efficiency在產(chǎn)婦到合子過(guò)渡期間。EMBO J. 35,2087年至2103年,2016。
    12. Clark,WC,Evans,ME,Dominissini,D.,Zheng,G.and Pan,T.tRNA base methylation identification and quantification via high-throughput sequencing。RNA 22,1771年至1784年,2016。
    13. Liu et al。ALKBH介導(dǎo)的tRNA去甲基化調(diào)節(jié)翻譯。細(xì)胞167, 816-828,2016年,
    14. Burke,JM,Kincaid,RP,Nottingham,RM,Lambowitz,AM和Sullivan,CS DUSP11對(duì)三磷酸化轉(zhuǎn)錄物的活性促進(jìn)Argonaute與非病毒性病毒微小RNA的結(jié)合并調(diào)節(jié)細(xì)胞非編碼RNA的穩(wěn)態(tài)水平。基因與發(fā)育30,2076年至2092年,2016年
    15. Zubradt,M.,Gupta,P.,Persad,S.,Lambowitz,AM,Weissman,JS和Rouskin,S.DMS-MaPseq for genome-wide or targeted RNA structure probing in vivo。自然方法10.1038 / nmeth.4057,2016。

 

產(chǎn)品報(bào)價(jià)如下:

貨號(hào) 品名 規(guī)格 價(jià)格  品牌 
TGIRT10TGIRT™-III Enzyme10 ul2011 InGex
TGIRT50TGIRT™-III Enzyme50 ul6635 InGex
TGIRT 5 x 50TGIRT™-III Enzyme5 x 50 ul29998 InGex
TGIRT 10 x 50TGIRT™-III Enzyme10 x 50 ul57118 InGex

 

我們公司zui大優(yōu)勢(shì)是強(qiáng)大的采購(gòu),

1:基本什么都能進(jìn)口,血清,抗體,耗材,還有部分限制進(jìn)口的,

2:貨品全,現(xiàn)經(jīng)營(yíng)過(guò)700多個(gè)品牌,基本所有生物試劑耗材都可以進(jìn)口,特別是冷偏的產(chǎn)品那就更有優(yōu)勢(shì),

3:提供加急服務(wù),一般1-2周到貨,超過(guò)時(shí)限加急費(fèi)全免

4:價(jià)格公道,絕大部分價(jià)格有優(yōu)勢(shì),當(dāng)然不能保證100%產(chǎn)品都是,因?yàn)橐馕吨鴽](méi)有服務(wù).

5:良好的信譽(yù),大部分客戶(hù)我們提供貨到付款服務(wù),客戶(hù)包括清華,北大 交大 復(fù)旦,中山等100多所大學(xué),ROCHE,阿斯利康,國(guó)藥 ,fisher等500多家公司

6:我們*代理的品牌有:Antibody Research Corporation,arcticzymes,Biorelevant,AmberGen, Inc. ,clemente-associates,clodronaiposomes,Columbia Biosciences,enzyme research,Gene Bridges GmbH,Genovis,AmberGen, Inc.  Biotechnology GmbH,Haematologic Technologies HTI Haemtech,hookelabs,Immudex,Innovative Research of America,inspiralis ,List Biological Laboratories, Inc.,lumafluor,Microsurfaces,multiplicom,nanotools,Pel-Freez Biologicals,pentapharm,progen,Protein Ark,QA-Bio,Inc,QA-Bio,IncQuickZyme Biosciences,Teknova,TriLink BioTechnologies, Inc.,Zyagen Laboratories 等

7:我們還是invitrogen,qiagen,Midland BioProducts Corporationam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名*批發(fā),歡迎合作。

国产在线播放观看| 亚洲一区二区在线免费观看视频| 肉色欧美久久久久久久免费看| 右手影院亚洲欧美| 欧美性猛交一区二区三区| 国产精品视频二区三区| 久久久久久久一区| 国产 欧美 自拍| 欧美成人vps| 麻豆影视在线观看_| 精品91一区二区三区| 五月天精品一区二区三区| 日本美女一区| 欧美精品国产精品| 亚洲无人区码一码二码三码的含义| 成人免费在线观看视频网站| 在线免费视频你懂得| 超碰在线免费看| 在线免费观看av影视天堂| 丁香六月婷婷| 久热免费视频| 久久色在线播放| 欧美在线xxx| 午夜激情一区| 999精品一区| 91麻豆精品国产91久久久久久久久| 国产一二区在线观看| 2023国产精品自拍| 亚洲精品一区二区在线播放∴| 六月丁香色婷婷| 日韩欧美成人一区二区| 亚州av一区| 鲁啊鲁视频在线精品| 欧美日韩一区二区三区不卡| 亚洲精品小视频在线观看| 欧美一区二区三区观看| 久久视频精品在线观看| 理论在线观看| 伊人电影在线观看| 欧美日韩大片一区二区三区| 天堂入口网站| 国产成人亚洲精品播放器下载| 日韩色妇久久av| 91女人18毛片水多国产| 成人福利视频| 国产精品灌醉下药二区| 欧美美女喷水视频| 欧美人与动牲性行为| 综合一区二区三区| 国产欧美日韩激情| 在线观看国产区| 性色一区二区| 自拍偷拍第八页| 亚洲网站视频在线观看| 久久婷婷国产精品| av一区二区三区黑人| 韩国视频一区二区三区| 成人在色线视频在线观看免费大全| 永久免费黄色软件| 国产精品久久久久久亚洲影视| 亚洲精品不卡在线| 亚洲人成无码网站久久99热国产| 亚洲视频狠狠| 91国产免费视频| 色诱亚洲精品久久久久久| 日产精品久久久一区二区福利| 国产在线一级片| 国产在线三区| 国产激情在线看| 在线电影看在线一区二区三区| 亚洲欧美tv| 热re99久久精品国产66热| 91av在线免费视频| 91大神精品| 麻豆精品视频在线观看| 蜜桃视频一日韩欧美专区| 亚洲国产精品一区二区久久恐怖片| 日韩欧美国产综合| 国产精品爱啪在线线免费观看| 亚洲国产精品福利| 日本肉体xxxx裸体784大胆| 俄罗斯嫩小性bbwbbw| 亚洲日韩视频| 性xxxx视频播放免费| 午夜欧洲一区| 欧美精品一二三| 欧美一区二区三区的| 一级片视频在线观看| 国产精品亚洲第一区| 亚洲精品v欧美精品v日韩精品| 日本不卡视频在线| 国产精品嫩草在线观看| 免费在线观看麻豆视频| 在线观看午夜看亚太视频| 99re8在线精品视频免费播放| 亚洲日本香蕉视频| 日韩丰满少妇无码内射| 国产精品videossex久久发布| 国产一区二区免费| 最近久乱中文字幕| www.看毛片| aa亚洲婷婷| xxx免费视频| 男男gay免费网站| 大奶在线精品| 欧美日韩理论片| 国产精品久久久久久免费播放| 黄色大片在线看| 视频一区视频二区欧美| 国产欧美精品一区二区三区| 亚洲一区二区四区| 欧美精品手机在线| 欧美日韩国产成人在线| 久草免费资源| 久久成人18免费网站| 欧美夜福利tv在线| 亚洲精品乱码久久久久久蜜桃图片| 国产无遮挡裸体免费久久| 在线电影中文字幕| 欧美jizz| 91青青草视频| 依依综合在线| sis001亚洲原创区| 两个人看的免费完整在线观看| 妞干网免费视频| 另类专区亚洲| 日韩欧美一区电影| 一本大道久久精品| 草草视频在线| 97久久精品人人做人人爽| 欧美激情精品久久久久久| 欧美 丝袜 自拍 制服 另类| 天堂资源在线亚洲视频| 欧美日韩国产经典色站一区二区三区| 欧美性猛交xxxx黑人猛交| 亚洲精品午夜国产va久久成人| 视频精品一区| 日韩主播视频在线| 2020中文字幕在线| 亚洲精品一区二区三区不| 91丨精品丨国产| 日本猛少妇色xxxxx免费网站| 欧美老年两性高潮| 精品国产va久久久久久久| 国产伦精品一区二区三区照片| 国产精品劲爆视频| 在线国产亚洲欧美| 日韩欧美在线番号| 亚洲夫妻av| 欧美热在线视频精品999| 精品人妻aV中文字幕乱码色欲| 日韩中文字幕亚洲一区二区va在线| 欧美揉bbbbb揉bbbbb| 久久er精品视频| 国产乱码一区二区三区四区| 91精品国产综合久久香蕉的特点| 亚洲精品中文字幕乱码无线| 国产又粗又猛又爽又黄的网站| 天堂av网在线| 一本色道69色精品综合久久| 亚洲精品一二三四区| 成人在线观看黄| 一个色综合网| 波多视频一区| 91精品国产入口| 日韩欧美不卡在线观看视频| 在线观看免费小视频| 天天亚洲美女在线视频| 精品一区电影| 成人看的视频| 成人影视亚洲图片在线| 综合一区中文字幕| xxx免费视频观看| 久久91av| 免费观看国产视频| a天堂中文在线官网| 好看的av在线不卡观看| 刘玥91精选国产在线观看| 99在线免费观看视频| 美女18一级毛片一品久道久久综合| 精品视频一二区| 一区二区三区欧美久久| 亚洲精品欧美二区三区中文字幕| 91婷婷韩国欧美一区二区| 精品国产一区二区三区在线观看| 伪装者在线观看完整版免费| 大又大又粗又硬又爽少妇毛片| 国产精品99久久久久久人| 麻豆视频免费在线观看| 日韩中文字幕1| 69成人在线| 欧美女激情福利| 中文乱码免费一区二区三区下载| 日韩大陆欧美高清视频区| 欧美精品手机在线| 久久精品综合视频| 亚洲图片在线观看| 日韩免费高清视频网站| 亚洲欧美影音先锋| 在线视频精品一区| 97精品视频在线播放| 亚洲www啪成人一区二区麻豆| 丁香花五月婷婷| 天码人妻一区二区三区在线看| 国产区高清在线| 国产污视频在线看| 加勒比av中文字幕| 精品少妇一区二区| 亚洲成人在线播放| 美女把腿扒开让男人桶免费| 波多野结衣在线| 番号集在线观看| 亚洲a∨一区二区三区| 黄色国产网站在线播放| 女仆av观看一区| 国产在线日韩精品| 高清日韩一区| 国模无码视频一区二区三区| 成人av资源电影网站| 亚洲国产精品无码久久久| 精品国产老师黑色丝袜高跟鞋| 国产成人久久777777| 中文字字幕一区二区三区四区五区| 亚洲深夜福利网站| 99久久久精品| 日本中文字幕在线一区| 国产欧美日韩一区二区三区| 美女网站久久| 小泽玛利亚一区二区免费| 自拍亚洲一区| 久久久夜精品| 日韩国产中文字幕| 国产乱子轮xxx农村| 国产乱肥老妇国产一区二| 最新国产拍偷乱拍精品| 久久国产劲爆∧v内射| 免费观看久久av| 不卡大黄网站免费看| sm一区二区三区| 日韩av大片在线| 黄色一级视频在线播放| 日韩黄色精品视频| 国产91色在线| 亚洲av少妇一区二区在线观看| 国产午夜精品一区| 永久91嫩草亚洲精品人人| 黄色av一区二区| 日韩电影一区二区三区| 亚洲女人天堂色在线7777| 99久久伊人精品| 中文字幕一区二区三区乱码在线| 翔田千里一区二区| 无吗不卡中文字幕| 99精品国产高清一区二区麻豆| 国产精品网站在线播放| 夜夜嗨av一区二区三区网页| 亚洲欧美国产一区二区| 成人一级片网址| 四虎免费在线观看视频| 国产亚洲一卡2卡3卡4卡新区| 亚洲天堂av一区二区| 成人激情综合网站| 精品欧美一区二区三区精品久久| 国产精品视频一区二区三区,| 黄色视屏在线免费观看| 欧美精品1区2区3区| 午夜视频你懂的| 亚洲无码精品在线观看| 亚洲女人初尝黑人巨大| av在线亚洲色图| 天堂精品高清1区2区3区| 亚洲91av视频| 午夜激情成人网| 国产成人在线观看免费网站| 蜜桃视频一区二区三区| 少妇精品无码一区二区三区| 国产在线精品视频| 免费看黄色aaaaaa 片| 亚洲成人资源网| 日本天堂影院在线视频| bbw丰满大肥奶肥婆| 人妖粗暴刺激videos呻吟| 日韩av免费播放| 免费日韩视频在线观看| 国产在线精品一区二区三区不卡| 国内精品国产三级国产99| 欧美国产一区视频在线观看| 欧美高清免费| 欧美做受69| 日韩av在线综合| 国产原创在线视频| 一区二区精品| 国产一区二区女内射| 欧美一区激情视频在线观看| 亚洲精品日韩成人| 黄色的电影在线-骚虎影院-骚虎视频| 一本色道久久88综合日韩精品| 国产精品xxx在线观看| 97精品电影院| 亚洲天堂视频在线观看免费| 成人免费网站视频| 久久久精品2019中文字幕神马| 久草在线免费福利| 国产一区二区三区不卡av| 亚洲一区二区免费视频| 欧美另类暴力丝袜| 久久精品视频免费播放| 国产精品第一国产精品| 51国产成人精品午夜福中文下载| 国产精品一二三区| 欧美激情videoshd| 欧美三级美国一级| 免费h网站在线观看| 国产九九视频一区二区三区| 欧美理论片在线观看| 免费在线观看的av网站| 国产综合视频一区二区三区免费| 丝袜美腿亚洲色图| 国产精品日本精品| eeuss影院在线播放| 久久精品这里都是精品| 国产精品久久久久久久一区二区| 国产成人精品在线播放| 俺去啦在线观看| 国产精品91久久| 老司机午夜免费福利视频| 2欧美一区二区三区在线观看视频| 久久久久久久久久久免费|